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當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞被細菌污染后,可以嘗試以下處理方法:一、初步判斷細菌類型1.革蘭氏染色法①操作過程:首先,制作細胞涂片,自然干燥后,通過火焰固定。然后用結(jié)晶紫初染1-2分鐘,水洗后加碘液媒染1分鐘,再用95%乙醇脫色約30秒(具體時間可根據(jù)涂片的實際情況調(diào)整),最后用番紅復(fù)染1-2分鐘。水洗、干燥后在顯微鏡下觀察。②判斷依據(jù):如果細菌被染成紫色,為革蘭氏陽性菌;如果被染成紅色,則為革蘭氏陰性菌。這一步很關(guān)鍵,因為不同類型的細菌對不同抗生素的敏感性不同,革蘭氏染色可以為后續(xù)選擇合適的...
造成細胞污染的微生物主要包括細菌、真菌、支原體、病毒以及外源性細胞。這些微生物可以通過實驗室環(huán)境、實驗材料、操作人員或?qū)嶒炘O(shè)備等途徑進入細胞培養(yǎng)系統(tǒng),導(dǎo)致細胞培養(yǎng)物的污染。以下列舉了一些常見的造成細胞污染的微生物及其特點,一起來學(xué)習(xí)下吧!細菌污染1.大腸桿菌(Escherichiacoli)①形態(tài)特點:為革蘭氏陰性短桿菌,大小約0.5-0.7μm×1-3μm,細胞呈桿狀,兩端鈍圓,多數(shù)單獨存在或成雙排列。②生長特性:是兼性厭氧菌,在有氧和無氧環(huán)境下都能生長。在細胞培養(yǎng)基中生長...
判斷細胞是否被污染可以從以下幾個方面入手:一、肉眼觀察1.培養(yǎng)基外觀-渾濁度:正常的細胞培養(yǎng)基是澄清透明的。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁,這是細胞可能被細菌污染的一個明顯跡象。細菌在培養(yǎng)基中大量繁殖會導(dǎo)致培養(yǎng)基變渾濁,就像一杯清水變成了有雜質(zhì)的渾水一樣。例如,常見的大腸桿菌污染會使培養(yǎng)基在短時間內(nèi)(通常1-2天)變得很渾濁。-顏色變化:培養(yǎng)基的顏色也能提供線索。多數(shù)細胞培養(yǎng)基含有pH指示劑,如酚紅。正常情況下,細胞代謝會使培養(yǎng)基的pH值發(fā)生一定變化,顏色也會相應(yīng)改變。但如果顏色變化...
細胞污染是細胞培養(yǎng)過程中常見的問題,它會影響實驗結(jié)果的準確性和可靠性。以下是細胞污染的主要原因和相應(yīng)的處理方法:一、細胞污染的原因1.操作環(huán)境不潔凈-空氣因素:細胞培養(yǎng)室的空氣質(zhì)量差是導(dǎo)致污染的常見因素之一。如果沒有安裝高效空氣過濾器(HEPA),外界空氣中的微生物(如細菌、真菌孢子)就容易進入培養(yǎng)環(huán)境。此外,人員頻繁進出培養(yǎng)室、通風(fēng)系統(tǒng)不完善等也會增加空氣中微生物的含量。-臺面和儀器設(shè)備:細胞培養(yǎng)操作通常在超凈工作臺中進行,但如果超凈工作臺的濾網(wǎng)長時間未更換、紫外燈殺菌不c...
WesternBlot實驗,也叫蛋白質(zhì)免疫印跡實驗,主要用于檢測和分析樣品中的特定蛋白質(zhì)。該技術(shù)涉及將蛋白質(zhì)樣品通過凝膠電泳分離,然后轉(zhuǎn)移到膜上,通常使用硝酸纖維素或聚偏氟乙烯膜。轉(zhuǎn)移后,膜上的蛋白質(zhì)與特異性抗體結(jié)合,這些抗體可以識別目標蛋白。通過使用標記的二抗,可以檢測出與目標蛋白結(jié)合的抗體。最后,通過化學(xué)發(fā)光、熒光或放射性標記等方法來可視化目標蛋白。WesternBlot實驗廣泛應(yīng)用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,用于蛋白質(zhì)表達分析、疾病標志物的檢測以及信號傳導(dǎo)途徑的研究。具體實驗...
15664:RosetteSep™HumanGranulocyteDepletionCocktail15664HLA:RosetteSep™HLAGranulocyteDepletionCocktailStemcell的“15664”和“15664HLA”其中的關(guān)鍵差異可能體現(xiàn)在與“HLA”相關(guān)的特性或功能上。1.主要成分與靶向細胞差異RosetteSep™HLAGranulocyteDepletionCocktail:這個產(chǎn)品可能是專門針...
DMEM高糖培養(yǎng)基是一種廣泛使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,適用于多種哺乳動物細胞培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來,目前已廣泛用于各種細胞的培養(yǎng)。主要成分:1、糖類:主要為葡萄糖,是細胞生長所需的主要能源。2、氨基酸:包含多種必需和非必需氨基酸,如谷氨酸、丙氨酸、賴氨酸等,是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位。3、維生素:如維生素C、維生素E等,對細胞正常生長和代謝至關(guān)重要。4、礦物質(zhì):如鈣、鎂、鈉等,對細胞的正常功能和代謝過程具有關(guān)鍵作用。5、氨基酸類似物:如谷胱甘肽、胱氨酸...
HBSS培養(yǎng)基可用于多種細胞培養(yǎng)用途,如在解離細胞前的沖洗,運輸細胞或組織樣品,稀釋細胞用于細胞計數(shù),以及用來配制各種試劑溶液。不含鈣鎂離子的配方可用于細胞解離前清洗螯合劑。HBSS在細胞培養(yǎng)中具有多種應(yīng)用,如解離前清洗細胞、運輸細胞或組織、稀釋細胞進行計數(shù)以及制備試劑等。在使用HBSS培養(yǎng)基過程中,需要注意以下幾點:1、無菌操作:HBSS在配制和使用過程中應(yīng)保持無菌狀態(tài),以避免污染細胞。2、pH調(diào)節(jié):配制好的HBSS應(yīng)調(diào)節(jié)至適宜的pH值(通常為7.2~7.4),以確保細胞生...