Vero殘留DNA檢測(cè)試劑盒是用于定量檢測(cè)各種生物制品的中間品、半成品和成品中Vero宿主細(xì)胞DNA殘留量的專用試劑盒。
操作步驟:
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:用試劑盒中提供的 DNA 稀釋液將 Vero DNA 定量參考品進(jìn)行梯度稀釋,如稀釋濃度依次為 3000pg/μL、300pg/μL、30pg/μL、3pg/μL、0.3pg/μL、0.03pg/μL、0.003pg/μL。
制備陰性質(zhì)控:取供試品基質(zhì)溶液或樣本稀釋液,按照一定方法制備陰性質(zhì)控 NCS。
配制反應(yīng)體系:根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量,計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù),進(jìn)而計(jì)算所需的 qPCR Master Mix 和引物探針混合液的總量,將兩試劑混合,配制反應(yīng)混合液。
加樣:在 96 孔 PCR 板或?qū)S玫?qPCR 微量反應(yīng)管中先加入反應(yīng)混合液,再分別加入空白對(duì)照、陰性質(zhì)控、待測(cè)樣品、標(biāo)準(zhǔn)品溶液等。
上機(jī)檢測(cè):設(shè)置好 PCR 反應(yīng)程序,如三步法反應(yīng)程序:37℃2min;95℃30s;95℃10s,60℃30s 采集熒光,40 個(gè)循環(huán),反應(yīng)體積為 30μL。然后將反應(yīng)板或反應(yīng)管放入 qPCR 儀中進(jìn)行檢測(cè)。
結(jié)果分析:根據(jù)儀器自動(dòng)判讀或人工分析擴(kuò)增曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出待測(cè)樣品中 Vero 殘留 DNA 的含量。
Vero殘留DNA檢測(cè)試劑盒廣泛應(yīng)用于生物制藥、疫苗生產(chǎn)等領(lǐng)域,用于檢測(cè)重組蛋白藥物、疫苗等生物制品中Vero宿主細(xì)胞殘留DNA的含量。有助于評(píng)估生物制品的純度和安全性,保障產(chǎn)品質(zhì)量。