轉染細胞的方法有很多，這里介紹一種比較經濟實用的轉染試劑--聚乙烯亞胺(即PEI)。PEI（polyethylenimine）是一種帶有高電荷陽離子的多聚物，非常容易結合帶負電荷的DNA分子，形成復合物，并轉染到貼壁和懸浮細胞中，常用于大規(guī)模瞬時轉染表達。在HEK293和CHO等細胞中轉染效率較高。那么如何利用PEI轉染細胞呢？

實驗前準備：

PEI (polysciences, Cat#:24765-1),將PEI配置成1ug/ml，用0.2μm濾膜過濾，并分裝儲存于負80度。

實驗步驟（以轉染293T為例）：

1.在六孔板中鋪10萬個細胞，在二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育過夜。

2.在100ul DMEM中加入2ug目的質粒。如果是10cm皿可以加入5ug質粒。

3.加入10ul PEI，立即混勻。室溫孵育10min。

4.然后再補加600ul DMEM培養(yǎng)基。

5.吸掉六孔板中的培養(yǎng)基，然后將700ul混合液慢慢加入到細胞中，輕輕搖晃混勻。

6.在二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育3小時，然后加入2ml wan全培養(yǎng)基（DMEM+10%FBS）。

7.培養(yǎng)箱中孵育48小時，進行下一步實驗。

本期內容：如何利用PEI轉染細胞呢？

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